實驗目的

　　為了提?貯存穩定性、降低?醇殘留量，將卡巴他賽納?脂質體制備成凍?注射劑，并對凍??藝進?了研究與優化。以凍?產品的外觀、主藥含量、包封率、?分含量、?醇殘留量、貯存穩定性為評價指標，考察了凍?保護劑 (蔗糖) ?量、料液裝量、預凍速度、?燥溫度對產品質量的影響。

實驗步驟

凍干保護劑的選擇及用量

　　凍?過程中會產?冰晶?破壞脂質體結構。通常，為了保護脂質體的結構，會加?凍?保護劑，如海藻糖、蔗糖、乳糖、?露醇等。前期研究表明，?露醇作為凍?保護劑時保護效果較差、粒?易聚集；乳糖作為凍?保護劑時的保護效果與蔗糖相近，但部分患者的乳糖耐受性較差；海藻糖屬于注射級輔料，作為凍?保護劑時保護效果也較好，但價格較?。綜上所述，本研究選?蔗糖為凍?保護劑，以凍?產品的外觀、?分、復溶再分散時間(t再分散，指凍?產品完全溶解所?時間) 為評價指標，考察蔗糖與磷脂的質量?對凍?產品質量的影響。

凍干工藝優化

　　冷凍?燥過程包括預凍和?燥。為了降低能耗、提?效率，本研究從預凍階段降溫速度、?次?燥溫度、?次?燥溫度3個??對凍??藝進?研究與優化，以縮短凍?周期。

　　2.1 預凍階段

　　預凍階段中料液的凍結程度或狀態會直接影響后續?燥過程的效率和產品質量，依據1納?脂質體混懸液的共晶點，將預凍溫度設為 –40 ℃。采?電阻法判斷樣品的凍結程度，考察隔板從室溫降到-40 ℃所?時間(t1)對凍?脂質體產品質量的影響。

　　2.2 ?次?燥階段

　　?次?燥?稱升華?燥，主要?的是除去產品中的?結合?。該階段的主要?藝參數是升華?燥溫度和?燥時間(t升，指從?次?燥開始到?線完全消失及之后繼續保溫2 h的總時?)。依據1納?脂質體混懸液的共熔點，分別選擇-15℃和-10℃作為升華?燥溫度進?考察。設計?次?燥?案如表所?，記錄?線消失時間，并對制得的凍?產品的外觀、t 再分散、?分含量等指標進?評價。

　　2.3 ?次?燥階段

　　?次?燥?稱解析?燥，主要?的是去除在?次?燥中?法去除的、未凍結的部分吸附?和結合?，其?燥效果主要受?燥溫度影響。由于實驗室?常溫度約為24℃，為了避免出箱溫度低于環境溫度?使空?中的?分凝結在產品上導致產品吸濕，將?次?燥溫度設置在 24℃以上。同時，結合輔料的熱穩定性，考察了?次?燥溫度分別為25℃和28℃對凍?產品質量的影響。記錄?燥終點，并對凍?產品的外觀、t再分散、?分含量及室溫 (放置24 h)和4℃ (放置48 h)下穩定性 (粒徑、PDI、pH值) 進?評價。

實驗結果

凍干保護劑的選擇及用量

表1 凍?保護劑?量對凍?納?脂質體質量的影響

　　可?，當m糖/m脂=5.0或7.5時，凍?產品表?平整、?塌陷，但m糖/m脂=7.5時，產品中?分含量較?，約為m糖/m脂=5.0時產品的3倍，因此，選擇m糖/m脂=5.0 進?后續研究。

凍干工藝優化

　　2.1 預凍階段

　　試驗結果表明，當t1=20 min 時，凍?產品的顆粒較細膩 ;當t1=90 min 時，凍?產品的顆粒較粗糙;于-40℃保持3 h時，電阻值較?，此時1納?脂質體混懸液完全凍實，繼續在-40℃保持2 h后，進?升華?燥階段。由于粒?細膩的凍?脂質體產品引濕性較強，不利于保存;并且降溫速度過快易形成較多粒徑較?的冰晶?損傷脂質體膜，?慢速降溫則可形成較?的冰晶，可避免破壞脂質體膜。此外，縮短隔板降溫時間對凍?機的性能要求較?，且在?燥過程中需要更多的能量才能達到預期的?燥效果，因此設置 t1=90 min。 綜上所述，優化后預凍階段?藝參數為：預凍溫度-40℃，t1=90 min，隔板降溫到-40℃時，保溫時間(t2)=5 h。

　　2.2 ?次?燥階段

　　結果顯?，?案①所得凍?產品呈??花籃狀，表?塌陷嚴重，不符合1納?脂質體凍?粉的外觀要求，且復溶性差 ;??案②所得1納?脂質體凍?粉緊貼瓶壁，呈疏松的??圓柱形塊狀物，表?平整，其?線消失時間為12 h，t再分散=20 s，?分含量為1.0%，貯存穩定性良好，且包封率較? (表3)。因此本研究將升華?燥溫度設為-15℃，t升設為14 h。

表2 ?次?燥的凍?參數設計

表3 ?案②制備的凍?注射劑的貯存穩定性及包封率

　　2.3 ?次?燥階段

　　結果如表4所?，?次?燥溫度為25或28℃時，所得凍?產品的外觀均為緊貼瓶壁的??圓柱形疏松塊狀物，表?平整、?塌陷，且t再分散均為20 s，?分含量均低于2%，其他各項評價指標均相近且表現良好。?次?燥溫度為25和28℃時，到達?燥終點所需時間分別為61.50和48.83 h，t解分別為40.67和28.00 h。為了節約時間、減少能耗，本研究將解析?燥溫度設為28℃，解析?燥時間設為28 h，凍?全程總耗時為48.83 h。

表4 ?次?燥溫度對凍?納?脂質體質量的影響

優化的凍干工藝

　　綜上所述，優化凍??藝為：蔗糖與磷脂的質量?為5.0；脂質體中卡巴他賽質量濃度為2mg/mL，規格為每瓶20mg；?林瓶選?20或30mL的規格，當?林瓶規格為20mL時，料液與?林瓶體積?為1∶2，當?林瓶規格為30mL時，料液與?林瓶體積?為1：3；采?階段式升溫，凍?曲線如圖1所?，預凍溫度為-40℃，隔板降溫時間為 90 min，-40℃時保溫5h；?次?燥溫為-15℃，?次?燥時間為14h；?次?燥溫度為28 ℃，?次?燥時間為28h。